高性能疏水色谱柱是生物制药领域分离分析的关键工具,其核心原理基于溶质分子与固定相间疏水相互作用的差异。以纳谱分析的BioCore HIC系列为例,该系列包含Butyl、Phenyl和OH三款色谱柱,均采用单分散大孔硅胶微球基质,通过先进的表面键合与修饰技术实现高柱效和低非特异性吸附。其中,BioCore HIC-Butyl针对单抗偶联药物(ADC)的DAR值测定进行优化,具有高回收率和批次间一致性;BioCore HIC-Phenyl适用于ADC药物不同组分的分离,展现优异的选择性;而BioCore HIC-OH则专注于双抗和融合蛋白的分离,通过独t表面修饰工艺降低非特异性吸附。
1、分离性能方面
高选择性:能够基于样品分子疏水性的差异,精准地实现不同物质的分离。例如对于单抗偶联药物分子(ADC)等复杂生物分子体系,可有效区分其不同组分,如纳谱分析BioCore HIC-Butyl色谱柱对单抗偶联药物分子就具有良好的选择性。
高柱效:先进的填料技术,如单分散大孔硅胶微球或特殊聚合物基质等,使得色谱柱具有高的柱效,能够提供更尖锐、对称的峰形,从而提高分离的准确性和分辨率,如TSKgel HIC-ADC Butyl色谱柱采用丁基键合无孔亲水性聚合物基质为填料,可实现高效的分离。
2、稳定性方面
良好的化学稳定性:可在较宽的pH范围内保持稳定,一般能耐受一定的酸性和碱性条件,部分产品pH适用范围可达2-8甚至更宽,如纳谱分析BioCore HIC系列色谱柱pH范围为2-813。同时,对有机溶剂也具有良好的耐受性,能在含有有机溶剂的流动相中正常使用。
热稳定性好:通常具有较高的耐温上限,一般在60℃左右,能够适应不同的实验和操作环境,保证在较高温度下仍能维持较好的分离性能和柱子的稳定性。
机械稳定性强:耐压上限较高,可承受较高的压力,如一些色谱柱耐压上限可达6000psi,能够满足高效液相色谱等高压操作的要求,确保在高流速下也能稳定运行,延长柱子的使用寿命。
3、其他方面
低非特异性吸附:通过独t的表面修饰工艺或化学设计,能够有效降低生物大分子与固定相之间不利的相互作用,减少非特异性吸附,提高目标物质的回收率,如纳谱分析BioCore HIC系列色谱柱采用先进的键合技术,最大限度地降低了生物大分子与固定相间的非特异性吸附。
良好的批次间一致性:严格的生产工艺和质量控制体系,保证了不同批次生产的色谱柱具有高度一致的性能,确保实验结果的重现性和可靠性,如纳谱分析每批次BioCore HIC-Butyl填料都按照严格的质量管理体系生产,使用相关生物大分子质检以确保分离性能和批次间一致性。
广泛的应用范围:适用于多种类型的样品分离,包括生物技术、生物制药领域中的蛋白质、抗体、多肽等生物大分子,以及一些有机小分子等,如Sepharose Fast Flow HIC介质广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质和多肽的分离纯化。
