丁基疏水色谱柱是一款以丁基键合无孔型亲水性聚合物基质为填充剂的疏水作用色谱柱。其填料材料通常采用具有丁烷基疏水性质的有机硅，这种材料既具有良好的化学稳定性，又能有效地保持化合物分子的亲疏水平衡。此外，也有以粒径为2.5微米的丁基键合无孔型亲水性聚合物基质为填充剂的疏水色谱柱，如TSKgel Butyl-NPR色谱柱。
丁基疏水色谱柱的分离机理与反相色谱基本相同，都是利用溶质与固定相间的疏水相互作用实现分离。不同的是，其固定相的疏水性不如反相固定相强，多为低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。在高浓度盐溶液中，亲水性较强的物质分子内部的疏水基团外露，可与疏水的固定相以疏水作用力相结合（吸附）。由于这种作用力大小不同，可以通过改变极性流动相的离子强度（由高到低）使其依次解吸附，从而实现分离。
丁基疏水色谱柱的应用范围广泛，主要包括以下几个方面：
1、生物大分子分离分析
蛋白质：可用于蛋白质的分离纯化，例如在生物制药领域，对重组蛋白药物（包括单抗）的非均一性分析中发挥重要作用。一些丁基疏水色谱柱能够对离子交换色谱法无法分离的蛋白质结构异构体进行分离，还适用于在酸性条件下分离亲水性的多肽。
酶：可以对酶等生物大分子进行分析和分离，帮助研究人员了解酶的性质、结构和功能，以及在不同条件下的行为变化。
核酸：对于核酸类生物大分子，丁基疏水色谱柱也有一定的分离能力，可辅助研究核酸的结构与功能。
2、有机化合物分离
脂溶性化合物：丁基疏水柱常用于高效液相色谱（HPLC）分离脂溶性化合物，如脂肪酸、磷脂等亲脂性化合物的分离效果较好。
有机酸、有机碱：能够分离多种有机酸、有机碱等化合物，在化学合成、药物研发等领域有重要应用，可用于监测反应过程中有机化合物的纯度和含量。
3、多糖分离
可以用于分离大大小小的多糖，在多糖的结构鉴定、性质研究以及相关药物开发等方面具有应用价值。
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