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疏水色谱柱出现柱压高的原因有哪些?

更新时间:2023-02-21浏览:486次
 
  疏水色谱柱是一款以粒径为2.5um的,键合无孔型亲水性聚合物基质为填充剂的疏水作用色谱柱。适用于蛋白质、单抗、酶等生物大分子的分离分析。由于和药物安全以及生产成本息息相关,对于重组蛋白药物(包括单抗)的非均一性分析变得越来越被重视。TSKgelButyl-NPR(4.6mmIDX3.5cm)已经上市超过20年了,它以对蛋白的高速、高分辨率的分离性能为广大客户提供了帮助。新上市的Butyl-NPR(4.6mmIDX10cm)色谱柱具有更高的分辨率,可以满足生物制药的研究人员对于HPLC色谱柱的分辨率和分离选择性的更高要求。
  疏水色谱柱采用具有适度疏水性的填料,以含盐水溶液作流动相,借助于溶质与固定相间的疏水相互作用实现分离的色谱方法。其保留机理与反相色谱基本相同,所不同的是其固定相的疏水性不如反相固定相强,多为低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。疏水作用色谱主要用于蛋白质的分离与纯化。
  疏水色谱柱柱压高原因与解决方法:
  柱压过高是HPLC柱用户zui常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因:
  1、拆去保护柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查
  2、把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查
  3、将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动性)。这时,如果柱压仍不下降,再检查
  4、更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高,请与厂商。
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