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亲水色谱柱的使用与维护方法如下!

更新时间:2023-02-07浏览:371次
 
  亲水色谱柱是一种直接分离极性和亲水性化合物的色谱技术,为了便于理解,我们可以把它看作为是一种用反相色谱溶剂作流动相的正相色谱。因此,HILIC是亲水性的流动相,以水、有机溶剂和缓冲盐作为流动相。常见的HILIC方法采用50%~90%有机溶剂和一定比例的水,并且含有低浓度的缓冲盐。如乙腈/水/醋酸铵体系。在HILIC方法中,洗脱顺序和反相色谱正好相反,即极性越大,保留时间越长。
  亲水色谱柱的使用及维护方法;
  1、样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测,即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的亲水色谱柱。
  2、如果样品极性太强,或酸性太强;可以选择CN,NH2,或硅胶柱,HILIC(亲水色谱),也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换亲水色谱柱(缺点是离子对试剂平衡时间长,对流动相pH要求比较精密,否则很难重复实验,另外离子对试剂很难洗下来,基本上用了离子对的亲水色谱柱就不能再用于其它实验)。
  3、若样品是碱性的;可选择高纯硅胶柱(高纯硅胶缺少金属杂质,且硅胶端基封尾)或一些经过修饰的C18柱(如极性嵌入技术或碱去活技术等),他们都会减少碱性化合物的拖尾,一般会选择中性或偏碱的条件下做,因为这样可增加碱性样品的保留。
  4、如果碱性化合物的极性太强,或碱性太强;可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测(优点是方法开发简单,缺点是目前实现这一技术的色谱柱品牌比较少,价格也高)或者选用HILIC色谱柱(硅胶柱在反相条件下使用,这也是很经典的检测碱性样品的方法)选择强离子交换柱(缺点是不能用来分析其它样品,对流动相pH要求比较精密,否则很难重复实验)也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换亲水色谱柱。
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