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氨基柱须细心的维护才能更好的使用

发布时间:2022-04-14浏览:170次
 
  氨基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的,这一点不能忽略。对于新购柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速。如果流动相中还有缓冲盐类,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,避免缓冲盐的析出。
  氨基柱是非常“复杂”和“脆弱”的色谱柱,这就要求我们必须更加细心的去维护。
  1、比如每次使用前先接上两通,确保仪器系统中其他项目残留的流动相已被置换完全;
  2、比如在用于反相模式时,在开始使用前先用含有一定比例水相的不含缓冲盐的流动相过渡,而不要直接上带有盐相,特别是较高盐相的流动相——这是因为一般情况下,色谱柱都保存在纯乙腈/纯正相溶剂(如是正相溶剂,过渡模式需要更换,这个找机会在讲过)中,不过渡的情况下很可能发生盐析而破坏柱子,导致柱子寿命缩短;
  3、比如使用中确保不要配错流动相,防止溶剂走空等;
  4、再比如使用后确保清除完全柱子中的缓冲盐,并保存在纯有机相中(ACN)中;
  5、后需要提到的一点是,尽管4中要求冲洗完全,但是并不是代表可以一直冲洗一直冲洗,寿命跟流经柱子的流动相体积也在一定情况下成反比,我们必须找到一个经综合考虑后相对较优的中间点,如果无法确认是否冲洗干净,我们一般认为,10~20个柱体积基本上就能保证冲洗干净。柱体积怎么算?小编之前的文章中肯定有提到,对于内径4.6mm的色谱柱,一个柱体积简易的计算方式是0.1*L(柱长cm)。请记住冲洗的时间,定个闹钟,防止冲洗过渡而降低柱子的使用寿命。
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