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该如何消除TSK凝胶色谱柱的脱水现象呢?

发布时间:2020-04-12浏览:112次
       凝胶过滤色谱,又称凝胶渗透色谱。 一般来说,在生物化学界中常用的名称是凝胶过滤色谱(GFC),在高分子化学界中常用的名称是凝胶渗透色谱(简称GPC)。
  TSK凝胶色谱柱广泛应用于制药和生物工程中蛋白质,多肽,多糖,寡糖,DNA,RNA等生物高聚物的分离,纯化或分子量的测定。
  TSK凝胶色谱柱的脱水现象,可能是因为使用不当或长期放置保存过程中造成的。有些TSK凝胶色谱柱中由于没有气密密封圈,这种情况下色谱柱会随时间而易发生干燥现象。对于其他的所有种类色谱柱如不锈钢或玻璃柱等,如果柱栓未拧紧或者使用过程中空气意外进入到色谱柱中,均可能发生柱子干燥的情况。很容易就可以辨认到玻璃色谱柱出现的脱水现象,因为可以很容易地看到干燥的填充物与柱壁分离的现象。我们推荐采用下列步骤,以消除TSK凝胶色谱柱的脱水现象:
  1、按照相反的流动方向将色谱柱连接到液相系统上;
  2、不要将色谱柱与检测器相连;
  3、以推荐zui大流速的一半流速,使用滤过的20%乙醇超纯水溶液进行色谱柱的过柱;注意:反相色谱柱需要使用60%的乙醇。
  4、继续重复上述程序,直到您确信色谱柱已经再水化处理完毕。再水化处理可能需要几个小时的时间,这取决于色谱柱的尺寸大小;
  5、按照正确的流动方向将色谱柱连接到液相系统上;
  6、如果有机物不是正常流动相的一部分的话,要使用3个柱体积的超纯水冲洗色谱柱以去除有机物;
  7、使用上样缓冲液进行柱平衡(通常使用3——5个柱体积);
  8、使用QC 测试方法评价柱子的性能,以确保色谱柱能够正常使用。
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