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与传统HPLC相比,UPLC具有哪些优势?

发布时间:2016-05-25浏览:3624次
  与传统的液相色谱(HPLC)相比,UPLC具有以下优势:

  1.高分离度(ultra resolution)

  根据液相色谱分离的解析度方程,解析度正比于柱效能的平方根

  而根据范迪姆特(Van Deemter)色谱理论,柱效反比于系统固定相粒度大小。UPLC系统运用的固定相粒度能达到1.7μm,根据上述方程,该系统达到的效能将比5μm粒度系统高70%,而比3.5μm高40%。

  2. 高速度(ultra speed)

  在保证得到同样质量数据的前提下,UPLC能提供单位时间内更多的信息量。在不影响解析度的的情况下,小粒度能提供更高的分析速度,同样也能使柱长减少,根据Van Deemter色谱理论,zui优流速反比于粒度大小。

  例如,运用1.7μm的颗粒,相对于5μm颗粒,在不影响柱效的情况下,柱长将可以立方级的减少,而且可以在3倍的流速下运行,相同的解析度情况下,分离速度提高了9倍。

  3. 灵敏度(sensitivity)

  过去对于提高灵敏度的研究大都集中于检测器上,不论是光学检测器还是质量检测器。但是,其实运用UPLC也能提高分析的灵敏度。

  UPLC能提高柱效N,从而使峰宽w变的更窄,而峰高却增加了,同时,由于UPLC运用了更短的柱子(柱长L更小),进一步增加了峰高。因此,在提高柱效的同时,运用1.7μm的UPLC系统比5μm和3.5μm的系统灵敏度分别提高了70%和40%,而在柱效下相同情况下,能分别提供3倍和2倍的灵敏度。

  在仪器工艺方面,Waters ACQUITY UPLC采用了新型的色谱填料及装填技术,配备了的超高压液相色谱泵、自动进样器、高速检测器,并优化了系统的综合设计,使仪器分析能力大大增强。

  由于UPLC是一个新兴的领域,与传统的HPLC相比,UPLC的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍。目前,UPLC多应用于代谢组学分析及其他一些生化领域,在天然产物的分析方面运用也逐渐兴起,因为在这些领域深入研究需要更高的分析精度。使用UPLC与Q-Tof-MS或trap-tof-MS等质谱检测器连接,对天然产物分析,特别是中药研究领域的发展将是一个极大的促进。
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