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反相色谱柱的平衡方法

更新时间:2016-05-04浏览:3081次
 反相色谱柱的平衡方法

    聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围,即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此,在硅胶基质色谱柱适用受限的碱性pH下仍然可以使用。

    反相色谱柱载经过出厂测试后是保存在乙腈-水中的;由于色谱柱在储存或运输过程中固定相可能会干扰,这会引起键合相的空间结构发生变化,因此,新的色谱柱在用来分析样品之前,请一定要充分平衡色谱柱。

    反相色谱柱的平衡方法是:以纯乙腈或甲醇作为流动相,首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡过夜(请注意断开液相色谱仪检测器)。

    然后,将流速增加到0.8ml/min冲洗30min以便将色谱柱的填料充分平衡至*状态。平衡过程中,将流速缓慢地提高至获得稳定的基线,这样可以保证色谱柱的使用寿命,并保证在以后的使用中,获得分析结果的重现性。

    请一定确保所使用的流动相和乙腈-水互溶。如果您所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意首先用20倍柱体积的5%的乙腈-水流动相过渡,然后使用分析样品的流动相直至获得稳定的基线。

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