尺寸排阻色谱柱（Size Exclusion Chromatography Column，简称SEC柱），又称凝胶过滤色谱柱（GFC）或凝胶渗透色谱柱（GPC），是一种基于分子大小差异实现分离的液相色谱技术核心组件，广泛应用于生物大分子（如蛋白质、多肽、核酸）、合成高分子（如聚合物、PEG）及纳米颗粒的纯化、分子量分布测定与结构分析。
其分离原理不依赖于化学吸附或分配作用，而是利用多孔填料（固定相）的筛分效应：当样品随流动相流经色谱柱时，较小分子可进入填料微孔内部，路径长、保留时间久；而大分子因体积过大被排阻在孔外，直接随流动相快速流出。因此，分子按从大到小的顺序依次洗脱，实现按流体力学体积（或斯托克斯半径）的分离。
以下是尺寸排阻色谱柱具体问题及解决方法：
1、柱效下降
现象：峰形变宽、分岔、分离度下降。
原因：
样品与流动相未过滤，杂质堵塞柱子。
进样量超过柱体积的5%，或样品浓度过高、粘度大，产生“指形效应”。
流动相含有有机溶剂，导致柱效下降。
解决方法：
使用合适的溶剂冲洗柱子，如参考说明书或操作手册进行冲洗操作。
控制进样量和样品浓度，保证样品粘度与流动相一致。
确保流动相充分混合均匀后再进行分析。
2、柱压升高
现象：柱压超过正常范围，可能伴随流速下降。
原因：
柱头筛板堵塞，可能是由于流动相未过滤或滤膜孔径过大导致固体杂质滞留。
填料被污染，可能是由于样品中的非特异性吸附组分累积。
盐晶体析出，使用高浓度缓冲液后冲洗不彻d。
解决方法：
对于柱头筛板堵塞，可以采用反冲的方法去除堵塞物，或将流出液体直接排至废液桶防止二次污染。
对于填料被污染，可以卸下柱头螺丝，挖出柱内前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔细修复后重新安装上柱头螺丝。
对于盐晶体析出，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解，再换高浓度甲醇。
3、保留时间漂移
现象：保留时间不重现，可能影响峰面积的重现性。
原因：
流动相未完q混匀，导致洗脱强度变化。
流速或压力不稳定，可能是仪器泵液系统产生漏液或故障。
色谱柱使用条件超出范围，如pH值、温度、压力等。
解决方法：
确认流动相是新鲜配制的，比例没有错误。
确认色谱条件在色谱柱使用范围之内。
观察色谱峰形、柱效变化情况，确认色谱柱是否被污染，如果确定色谱柱污染，可尝试使用适当溶剂冲洗。
如果使用梯度洗脱方法，请确认平衡时间足够长。
4、峰形异常
现象：出现鬼峰、毛刺峰等。
原因：
鬼峰：可能是溶剂与流动相差异导致的基线波动，或系统中有杂质。
毛刺峰：柱身中进了空气。
解决方法：
对于鬼峰，通过排除法（如进空白溶剂、换柱子等）找到杂峰、鬼峰的来源并解决。
对于毛刺峰，通过长时间低流速的流动相冲洗去除气泡。
5、污染与寿命缩短
现象：色谱柱性能下降，寿命缩短。
原因：
样品和流动相中的杂质堵塞柱子。
在不适当的pH值、缓冲液种类或盐浓度下操作。
在极d温度或压力条件下使用。
解决方法：
样品与流动相进样前必须过滤，流动相建议现配现用。
严格按照操作规程使用和维护色谱柱，避免在不适当的条件下操作。
定期用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。
服务热线： 
