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一文读懂:C18反相色谱柱,到底能搞定哪些检测场景?

更新时间:2026-02-27浏览:21次
  C18反相色谱柱是高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱(UHPLC)中常用、应用广泛的固定相类型之一,属于反相色谱(Reversed-Phase Chromatography,RPC)的核心组件。其固定相以高纯硅胶为基质,表面通过化学键合方式连接十八烷基(—C₁₈H₃₇,简称C18)官能团,形成强疏水性表面,适用于分离中等极性至非极性化合物。
  在反相色谱模式下,流动相通常由水(或缓冲盐溶液)与有机溶剂(如甲醇、乙腈)组成。由于“相似相溶”原理,极性较强的组分与亲水性流动相作用更强,先被洗脱;而疏水性组分则更易被C18固定相保留,洗脱较慢,从而实现有效分离。通过调节流动相组成、pH值、温度或梯度程序,可灵活优化分离选择性、峰形和分析时间。
  以下是C18反相色谱柱的详细应用范围,按行业和化合物类型分类:
  1、制药与生物医药(最核心应用)
  这是C18柱用量最大的领域,涵盖了从研发到质控的全流程。
  小分子药物分析:绝大多数化学合成药物(如抗生素、止痛药、心血管药)都具有一定的疏水性,适合用C18柱分析。
  药物杂质与降解产物:检测主成分以外的微量杂质。
  药物代谢动力学(DMPK):分析血浆、尿液中的药物及其代谢物(通常需要高灵敏度的C18柱)。
  多肽与蛋白质:虽然大分子蛋白通常用离子交换或体积排阻,但对于小分子多肽(<10kDa)、胰岛素、酶解片段,C18柱是标准选择(通常需使用宽孔径300Å的柱子)。
  核酸与核苷酸:用于分析DNA片段、RNA、ATP/ADP等(常使用离子对试剂辅助)。
  2、食品与饮料安全
  用于检测食品中的添加剂、营养成分及有害残留。
  防腐剂与甜味剂:苯甲酸钠、山梨酸钾、糖精钠、阿斯巴甜等。
  维生素:脂溶性维生素(A,D,E,K)和水溶性维生素(B族、C)的分析(需调节pH和流动相)。
  农药与兽药残留:有机磷、有机氯农药、抗生素残留(如喹诺酮类、磺胺类)。
  真菌毒素:黄曲霉毒素、呕吐毒素等(通常需要衍生化或荧光检测配合)。
  食品添加剂:合成色素(如柠檬黄、日落黄)、抗氧化剂(BHA,BHT)。
  3、环境监测
  用于分析水、土壤、空气中的有机污染物。
  多环芳烃(PAHs):苯并芘等致癌物质,C18柱是分离PAHs的经典选择。
  酚类化合物:硝基苯酚、氯酚等工业废水污染物。
  农药与除草剂:阿特拉津、草甘膦等(草甘膦极性强,可能需要衍生化或使用HILIC模式,但许多除草剂可用C18分析)。
  工业化学品:多氯联苯(PCBs)、邻苯二甲酸酯(塑化剂)。
  4、化工与材料科学
  表面活性剂:非离子表面活性剂的同系物分离(如聚乙二醇醚类)。
  染料与颜料:分散染料、酸性染料的成分分析。
  聚合物添加剂:抗氧剂、紫外吸收剂、增塑剂的分析(GPC/SEC联用或反相分离)。
  有机合成中间体:监控反应进程,分离合成产物。
  

 

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