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使用丁基疏水色谱柱有哪些注意事项?

更新时间:2023-11-13浏览:568次
丁基疏水柱是一种常用的反相柱之一。它采用具有丁烷基疏水性质的有机硅做为填料材料,这种材料既有良好的化学稳定性,同时又能有效地保持化合物分子的亲疏水平衡,因而成为很多化学分离和分析的理想选择。
丁基疏水柱可以用于分离多种化合物,如有机酸、有机碱、多肽、多糖等,尤其对脂肪酸、磷指等亲质姓化食物的分离效果非常好。常用于高效液相色谱(HPLC)分离脂溶性化仓物。在蛋白质分离方面,丁基疏水柱常用于在酸性条件下分离亲水性的多肽,同时也可以分离大大小小的多糖。
 
使用丁基疏水色谱柱有哪些注意事项?
 
1、当使用2.1mm内径色谱柱时,建议优化系统以减少谱带展宽。
2、在0.1mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱,然后在2分钟内将流速升至0.5mL/min。
3、使用新鲜洁净的水与乙腈,冲洗系统,确保系统干净,不含任何缓冲盐和污染物。
4、将入口端连接到系统上,柱出口端先不要连接,色谱柱身上有箭头标明正确流向。
5、重启流速,按照步骤4的方法逐渐提高流速,至常规分析时所使用的流速。
6、参考柱效测试报告中的方法,使用该流动相条件平衡色谱柱,通常需要使用5-10倍柱体积的流动相,直至压力与基线稳定。
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