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疏水色谱柱具有哪些特点?

更新时间:2023-07-31浏览:483次
疏水色谱柱是利用样品分子与固定相的疏水力作用的不同,用流动相洗脱时,各组分迁移速度不同而达到分离的目的。流动相一般为pH 6-8的盐水溶液,具有对蛋白质的回收率高,蛋白质变性可能性小等优势。由于流动相中不使用有机溶剂,也有利于蛋白质保持固有的活性。
 
不同于反相色谱,在疏水反应色谱中上述官能团的密度较低,且蛋白分子只在一个或少数几个位置上吸附。
盐浓度较高时会产生吸附作用,但若加入低百分比浓度的有机溶剂降低盐浓度,则会产生脱附作用。
尽管二者均以疏水作用为基础,但HIC分离的选择性明显不同于反相LC。
相对于RPC,HIC的最高容量较低,但其优势在于:流动相条件(主要是含水流动相)通常不会破坏高阶蛋白质结构。
 
TSKgel Phenyl-5PW疏水色谱柱(HIC)能够有效分离抗体的结构同分异构体。在抗体药物中,对于一些由于等电点相同而无法通过离子交换色谱法实现分离的,但表面疏水性有差异的结构同分异构体、或多聚体,可以考虑使用疏水色谱法来进行分析。并且疏水色谱法也可以用于抗体降解产物的分析。
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