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如何正确使用反相色谱柱?

发布时间:2022-11-14浏览:177次
根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。
 
反相色谱柱是一种用于分离分析各种物质的高效液相色谱分离柱。反相色谱柱具有高效、灵敏和选择性好等优点,广泛应用于化工、医药、食品等工业领域以及环保监测等领域。
 
使用方法:
 
1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再依次以相同的流速相同的用量用氯、异丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)冲柱子;
 
2.以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠(LUNA)水溶液冲柱子(注意pH值切不可超过11.0),立即用水(0.5ml/min的流速,30倍柱体积)冲洗,再换成流动相;
 
3.配制流动相时,应各组分分别量取,比例较小的组分要精密量取,需调pH值时要精密到0.1;
 
4.反相条件下使用时,要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。理想的pH范围在pH3.0-7.0;
 
5.如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
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