层析柱的应用领域介绍

层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，从而分离的一种层析法。层析柱是层析实验的主体，可根据所要分离的样品的大小、性质决定层析柱的直径尺寸和填充物。

 

应用领域：

1、植物、中药有效成分地分离。

2、中药有效成分地精制。

3、中药中杂质的清除。

4、化工中间体、合成产品的纯化。

5、蛋白纯化、可以适配AKTA等蛋白纯化仪。

 

层析柱的装柱非常重要，装柱的效果会直接影响层析分离效果。有湿法装柱和干法装柱等两种方法。

湿法装柱很简单，使用也更普遍，就是先用比固定相多一倍的洗脱剂将固定相活成匀浆，柱子底部先用脱脂棉塞紧，然后倒入洗脱剂将脱脂棉中气泡赶出。用漏斗将活好的固定相倒入柱子中，打开底部活塞，将柱子中高出固定相的溶剂放出。期间不断用橡皮棒敲打，将固定相敲实， 做到密实均匀无气泡即可。很多时候用加压的方法可以很高效地装好柱子，而且在柱子中没有气泡产生。

 

干法装柱与湿法装柱刚好相反的是，它是将干燥的吸附剂从柱子上端直接加入到一个空的柱子中，然后用油泵抽柱子底部，相当于减压过柱，直到柱子变得很结实， 再用淋洗剂“走柱子” 。

 

干法装柱的一个缺点就是在装入洗脱剂后，由于溶剂和固定相之间的吸附放热，所以柱子容易变花，影响分离效果。解决的方法是：

（1）固定相一定要添加结实；

（2）一定要用较多的溶剂“走柱子”，直到柱子的下端不再发烫，恢复到室温后再撤去压力。无论使用哪种方法装柱，后都要求所装的柱子结实、匀称、无气泡。