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层析柱的应用领域介绍

发布时间:2022-09-13浏览:90次
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。层析柱是层析实验的主体,可根据所要分离的样品的大小、性质决定层析柱的直径尺寸和填充物。
 
应用领域:
1、植物、中药有效成分地分离。
2、中药有效成分地精制。
3、中药中杂质的清除。
4、化工中间体、合成产品的纯化。
5、蛋白纯化、可以适配AKTA等蛋白纯化仪。
 
层析柱的装柱非常重要,装柱的效果会直接影响层析分离效果。有湿法装柱和干法装柱等两种方法。
湿法装柱很简单,使用也更普遍,就是先用比固定相多一倍的洗脱剂将固定相活成匀浆,柱子底部先用脱脂棉塞紧,然后倒入洗脱剂将脱脂棉中气泡赶出。用漏斗将活好的固定相倒入柱子中,打开底部活塞,将柱子中高出固定相的溶剂放出。期间不断用橡皮棒敲打,将固定相敲实, 做到密实均匀无气泡即可。很多时候用加压的方法可以很高效地装好柱子,而且在柱子中没有气泡产生。
 
干法装柱与湿法装柱刚好相反的是,它是将干燥的吸附剂从柱子上端直接加入到一个空的柱子中,然后用油泵抽柱子底部,相当于减压过柱,直到柱子变得很结实, 再用淋洗剂“走柱子” 。
 
干法装柱的一个缺点就是在装入洗脱剂后,由于溶剂和固定相之间的吸附放热,所以柱子容易变花,影响分离效果。解决的方法是:
(1)固定相一定要添加结实;
(2)一定要用较多的溶剂“走柱子”,直到柱子的下端不再发烫,恢复到室温后再撤去压力。无论使用哪种方法装柱,最后都要求所装的柱子结实、匀称、无气泡。
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