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丁基疏水色谱柱在使用时有什么地方需要注意的呢?

发布时间:2021-03-12浏览:147次
   丁基疏水色谱柱是一款以粒径为2.5 um的,丁基键合无孔型亲水性聚合物基质为填充剂的疏水作用色谱柱。适用于蛋白质、单抗、酶等生物大分子的分离分析。
  采用具有适度疏水性的填料,以含盐水溶液作流动相,借助于溶质与固定相间的 疏水相互作用实现分离的色谱方法。其保留机理与反相色谱基本相同,所不同的是其固定相的疏水性不如反相固定相强,多为低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。疏水作用色谱主要用于蛋白质的分离与纯化。
  丁基疏水色谱柱的注意事项:
  1、当使用2.1mm内径色谱柱时,建议优化系统以减少谱带展宽。
  2、在0.1mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱,然后在2分钟内将流速升至0.5mL/min。
  3、使用新鲜洁净的水与乙腈,冲洗系统,确保系统干净,不含任何缓冲盐和污染物。
  4、将入口端连接到系统上,柱出口端先不要连接,色谱柱身上有箭头标明正确流向。
  5、重启流速,按照步骤4的方法逐渐提高流速,至常规分析时所使用的流速。
  6、参考柱效测试报告中的方法,使用该流动相条件平衡色谱柱,通常需要使用5-10倍柱体积的流动相,直至压力与基线稳定。
  由于和药物安全以及生产成本息息相关,对于重组蛋白药物(包括单抗)的非均一性分析变得越来越被重视。TSKgel Butyl-NPR(4.6 mm ID X 3.5 cm)已经上市超过20年了,它以对蛋白的高速、高分辨率的分离性能为广大客户提供了帮助。新上市的Butyl-NPR(4.6 mm ID X 10 cm)色谱柱具有更高的分辨率,可以满足生物制药的研究人员对于HPLC色谱柱的分辨率和分离选择性的更高要求。
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