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浅谈凝胶渗透色谱仪的色谱柱安装和使用

发布时间:2020-02-24浏览:387次
       凝胶渗透色谱也称为体积排阻色谱或尺寸排阻色谱,是液相色谱的一个分支,是高聚物表征的重要方法之一。凝胶渗透色谱是一个复杂的体系,需要考虑的问题很多。
  凝胶渗透色谱仪的基本组成为六通阀、净化柱、泵等;全自动型主要由样品进样和收集系统、泵、分离柱、溶剂及计算机控制系统等组成。
  凝胶渗透色谱仪的分离原理与通常使用的柱层析的区别主要是:通常柱层析是利用填料、样品和淋洗剂之间极性的差别来达到分离目的,而凝胶层析仪则是利用化合物中各组分分子大小不同而淋出顺序先后也不同而达到分离目的的,淋洗溶剂的极性对分离的影响并不起决定作用;对于净化含脂肪、色素较多的样品具有明显的优势。
  凝胶渗透色谱仪色谱柱的安装和使用
  1、在连接色谱柱之前,预先用即将使用的流动相体系置换以前用的流动相体系。
  2、在连接色谱柱时,要赶走因色谱柱保存不当或长时间不用在色谱柱的进口或者出口处产生的一些气泡。
  3、连接色谱柱要注意标示的色谱柱进出口方向。
  4、如果分析所用的温度较高,应在较低的流速下比如0.2到0.3ml/min的流速下缓慢地升高温度,当温度达到设定温度后,再慢慢地增大流速至设定值。
  5、如果色谱柱需要较长的时间才能平衡稳定,检查色谱柱连接处是否有漏液。
  凝胶渗透色谱仪不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离脂溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。近年来,凝胶色谱也广泛用于小分子化合物。相对分子质量相近而化学结构不同的物质,不可能通过凝胶渗透色谱法达到完全分离纯化的目的。凝胶色谱不能分辨分子大小相近的化合物,相对分子质量相差需在10%以上才能得到分离。
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