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解读HPLC色谱柱和UHPLC色谱柱相似但不相同的点

更新时间:2018-07-24浏览:3797次
1. HPLC色谱柱和UHPLC色谱柱这两款柱子是类似的。当然,不同系列的柱子可能配备其他的类型的色谱柱会有差异。Plus的只配备了同填料的制备柱;而XDB则同时配备了毛细管柱及制备柱;有同类型的制备柱这就方便我们从分析柱上无缝转移我们的方法到制备柱上。
2. 关于色谱柱的其他型号规格,诸如内径,粒径,配备的柱长就不多叙述,这点中就能比较清晰的看见两个不同型号的色谱柱配备了哪些规格的色谱柱。(这里的规格是指大家工作过程当中zui常说的柱长/粒径/内径)
3. 我们主要看下其填料类型:HPLC色谱柱和UHPLC色谱柱两款色谱柱都是TMS双封端(除plus系列中的苯基柱未封端)。温度上限均为60℃,pH使用范围为2.0——9.0.载碳量是我们平常除了第2条中的型号外比较关心的一个参数。通常我们说,载碳量大,保留更强。从这里我们可以看出来,以C18为例,XDB(10%)比plus(9%)应当保留更强。
4. 说到这里,说的都是HPLC色谱柱和UHPLC色谱柱两款柱子一样的参数。那他们不一样的地方在哪里呢?——孔径和比表面积。这两者的参数也直接影响到载碳量。孔径越小的填料,比表面积也会越大。从而可能导致载碳量更大。这点从上述两个系列的对比可以看出来。Plus孔径大,其比表面积就较XDB小,而恰好,XDB的载碳量就高于plus那么一点点。当然,载碳量还跟键合相的密度有关系。
5. 这两者色谱柱间相似的关键参数较多,所以,无论是在疏水选择性上,与组分的氢键相互作用上都比较相似,可以通用。当然,由于载碳量的差异,疏水选择性上会有微小的差异;另外,由于两者不同的孔径所带来的比表面积不一致,包括键合相密度差异则会带来形状选择性的差异。
6. zui后,尽管上述色谱柱推荐的ph使用范围为2——9,但是仍然建议若色谱条件为pH>7,特别是温度较高的情况,如果条件允许,就不要选择这两个系列的产品了。请选择耐更高pH的杂化柱。若需要在较强酸性条件下,也建议选择专门为酸性条件设计的色谱柱,当然,酸性条件没有碱性条件带来的对柱寿命的影响大,除非是比较极限的条件(如<1)。当然,如果您不介意柱寿命,也并非不能在比较极限的情况下使用柱子。从另一个角度来说,资源的可持续发展也要求我们对现有的资源达到利用zui大化。
色谱技术的发展给我们提供了非常便利的条件。除了传统的分析柱之外,快速分析柱、兼容于普通HPLC的核壳柱,当然还有UPLC/UHPLC柱给我们带来了较高的通量。我们可以在保证分离足够的情况下花费更短的时间。在实际工作过程当中,我们也可以有意识的把某些老的方法转移到更快速的柱子上,以达到更高的效率。
色谱柱的好坏并不局限,合适的就是好的。
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