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发布时间:2017/12/6   点击次数:190次
在液相色谱仪分析中,根据流动相和固定相相对极性的不同,可分为正相色谱反相色谱。所谓正相色谱是指固定相极性大于流动相极性的情况,反之,固定相的极性小于流动相的极性,则称为反相色谱。

正相分析的场合:
 
假设使用的溶剂是15%二氯甲烷/己烷混合溶液,样品在二氯甲烷中更易溶解。如果样品可以在流动相中完全溶解自然没有问题。
如果样品不能溶解在溶剂中,选择100%二氯甲烷作为溶剂的情况下可能会产生故障。 
在一般情况下,经常使用混合溶剂作为流动相。哪种组合最易于样品溶解可以从样品的洗脱时间上看出。在选择溶解样品的
溶剂之前,把流动相的组成在5~10%变化范围内各种样品的洗脱时间作比较,选择样品最容易溶解的溶剂。因为,样品和溶
剂、流动相互相溶解是分析的前提条件。

反相分析的场合:
 
假设使用的溶剂是50%的乙腈,使用的样品在乙腈中比在水中更易溶解。当然,最好的方法是使样品完全溶解于流动相中。
然而,如果样品不能溶解在流动相中,如何选择溶剂呢?100%的乙腈溶液?或者浓度50%以下的乙腈水溶液? 
这种情况下,第一个选择就是浓度50%以下的乙腈水溶液。第二个选择就是100%的水溶液,可以100~500微升注入。
最差的选择是100%乙腈溶液。因为即使样品完全溶解在了100%的乙腈溶液中,随着流动相的加入,可能乙腈溶液被稀释
导致样品析出。轻则造成上述a,b两种故障,重则向c,d发展。最严重则发生f的故障,那就只能更换色谱柱了。
然而,混合样品的情况下可能发生g的故障。判断样品会不会在色谱柱内部析出可以通过以下步骤。减少样品较易溶解的
溶剂量,然后试着增加注入量。也就是说,如果是要求注入在100%乙腈溶液中溶解的样品20ul,可以试着注入在20%乙腈
中溶解的样品125ul。如果上述的故障消失了,则说明使用100%乙腈作为溶剂是不合适的,样品会在色谱柱内析出。
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