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影响亲和色谱柱的因素有哪些?

发布时间:2016-10-14浏览:1100次

影响亲和色谱柱的因素有:

1)上样体积

若目标产物与配基的结合作用较强,上样体积对亲和色谱效果影响较小。若二者间结合力较弱,样品浓度要高一些,上样量不要超过色谱柱载量的5%~10%。(这个载量是什么意思,是指柱子所能吸附的zui大量吗。。求大神解释T ^T)

2)柱长

亲和柱的长度需要根据亲和介质的性质确定。如果亲和介质的载量(同上 求解释T ^T)高,与目标产物(目标物)的作用力强,可以选择较短的珠子(柱子);相反,则应该增加柱子的长度,保证目标产物与亲和介质有充分的作用时间。

3)流速

亲和吸附时目标产物与配基之间达到结合反应平衡需要一个缓慢的过程。因此,样品上柱的流速应尽量的慢,保证目标产物与配基之间有充分的时间结合,尤其是二者间结合力弱和样品浓度过高时。

4)温度

温度效应在亲和色谱中比较重要,亲和介质的吸附能力受温度影响,可以利用不同的温度进行吸附和洗脱。一般情况下亲和介质的吸附能力随温度的升高而下降,因此在上样时可选择较低的温度,使待分离物质与配基有较大的亲和力,充分地结合;而在洗脱时刻采用较高的温度,使待分离物质与配基的亲和力下降,便于待分离物质从配基上脱落。

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