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发布时间:2018-09-27   点击次数:100次
在高效液相分析检测样品的过程中,离子色谱柱会受到来自于样品及色谱系统的污染,从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。
来自于色谱系统的污染主要指,HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒,以及流动相系统过滤不完全残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指,未完全溶解的样品或者已完全溶解的样品进入色谱系统中,由于样品溶剂和流动相溶剂对样品溶解存在的溶解度差异,导致沉淀析出污染系统。
特别是对于中药、天然产物、合成中间体及生物药品的检测,因基质的复杂性,色谱柱受污染的情况会更加严重。污染会导致色谱系统压力升高、色谱柱塌陷、填料变色等,从而带来检测成本高,测试结果不准确等各种影响。
保护柱是液相色谱分析中重要的色谱耗材,使用保护柱可大大降低分析柱受污染的程度,延长分析柱使用寿命。
离子色谱柱保护柱位于进样器与分析柱之间, 作用主要两方面:
1. 截留不溶性颗粒
2. 吸附样品基质中的杂质
一、如何选择保护柱?
1. 保护柱的填料,与分析柱保持一致,填料品牌一致,才能100%确保选择性一致。
2.保护柱的规格,要与分析柱匹配,填料粒径一致,保护柱的内径与分析柱的内径相近。
3.对于精细分离,保护柱本身的装填柱效要足够好。
4.对于精细分离或者小内径色谱柱分离,保护柱的连接死体积要尽可能小。
5.如果是用于UHPLC柱,还要考虑保护柱的耐压能力。
保护柱不理想,就会导致峰扩散,分离度下降,不利于精细分离。
理想的保护柱,即使分析柱短小如4.6×100mm,安装保护柱后也未引起分离度与峰高的降低。
二、如何使用保护柱?
1.专柱专用。避免保护柱成为不同项目的交叉污染源。
2.及时更换保护柱。当峰的理论塔板数下降15%,或是柱压上升15%,或是关键分离度下降15%时,都应该及时更换保护柱。
3.不慎发生强污染时,可以将分析柱卸下,单独冲洗保护柱,可以使污染物更快的从保护柱中流出。——但是不可以超声保护柱。
 
 
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